Agar Sangue Base - 100 Gr - Himedia
Código: 19973
O Ágar Base Sangue é recomendado como uma base à qual o sangue pode ser adicionado
para uso no isolamento e cultivo de microorganismos patogênicos exigentes como Neisseria,
Streptococcus, etc.
Composição**
Ingredientes Gms / Litro
HM peptona B # 10.000
Triptose 10.000
Cloreto de sódio 5.000
Ágar 15.000
PH final (a 25°C) 7,3 ± 0,2
** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho
# Equivalente à peptona do coração bovino
Instruções
Suspenda 40,0 gramas em 1000 ml de água purificada / destilada. Aqueça até ferver para
dissolver completamente o meio. Esterilizar por autoclavagem a 15 libras de pressão (121°C)
por 15 minutos. Arrefecer a 45-50°C e adicionar assepticamente sangue desfibrinado estéril a
5% v/v. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.
Princípio e Interpretação
O Ágar Base Sangue é um meio altamente nutritivo geralmente usado como meio basal para a
preparação de ágar-sangue por suplementação com sangue. Também pode ser usado como
meio de uso geral sem a adição de sangue.
Os meios de base de ágar-sangue podem ser utilizados com adição de fosfato de fenolftaleína
(7) para a detecção de produção de fosfato Estafilococos, com adição de sal e ágar para
avaliação da contaminação da superfície de equipamentos e carcaça de suíno (2) e determinar
a faixa de salinidade das Flavobactérias marinhas (3). Também pode ser usado para a
preparação de antígenos de Salmonella Typhi (9).
A base de ágar-sangue é recomendada pela APHA (8) e métodos padrão (11, 1) para o teste de
amostras de alimentos. A peptona B e a triptose HM fornecem carbono, nitrogênio, aminoácidos
e vitaminas. O cloreto de sódio ajuda a manter a equilíbrio osmótico do meio. A adição de sangue
torna o meio mais nutritivo, proporcionando crescimento adicional fatores exigidos pelos
organismos exigentes. Também ajuda na visualização das reações hemolíticas. No entanto,
reações hemolíticas dependem do sangue animal usado. O sangue de ovelha fornece melhores
resultados para os estreptococos do grupo A (10). Mas o sangue de ovelha não consegue
apoiar o crescimento de Haemophilus haemolyticus, uma vez que o sangue de ovelha é
deficiente em nucleotídeos de piridina. No entanto, quando cavalo o sangue é usado colônias de
- haemolyticus produzem hemólise e imitam Streptococcus pyogenes (6).
Tipo de amostra
Material clínico: sangue e outro material patológico; amostras de alimentos.
Coleta e manuseio de amostras
Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo
com as diretrizes estabelecidas (4,5).
Para amostras de alimentos, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de
amostras, de acordo com as diretrizes (8).
Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem
descartados.
Aviso e Precauções
Apenas para diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Usar luvas de
proteção/de proteção vestuário/proteção ocular/proteção facial. Siga as boas práticas de
laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura.
As precauções padrão, de acordo com as diretrizes estabelecidas, devem ser seguidas
durante o manuseio de amostras clínicas. Orientações de segurança podem ser consultados
em fichas de dados de segurança individuais.
Limitações
- Recomenda-se a adição de sangue de ovelha para detectar hemólise. Este meio não suporta
o crescimento de H.haemolyticus.
- A adição de sangue de cavalo ou de coelho ao meio base suporta o crescimento de
H.haemolyticus, mas se assemelha a beta-hemolítica Estreptococos e, portanto, devem ser
confirmados.
- O padrão hemolítico varia de acordo com a fonte de sangue utilizada.
Desempenho e Avaliação
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro
do prazo de validade quando armazenado à temperatura recomendada.
Controle de qualidade
Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre
Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
Cor e clareza do meio preparado: Meio basal: gel de cor âmbar clara, clara a ligeiramente
opalescente. Após adição de 5% v / v de sangue desfibrinado estéril: Formas de gel opaco de
cor vermelho cereja em placas de Petri.
Reação: Reação de solução aquosa a 4,0% p/v a 25°C. pH: 7,3 ± 0,2
pH: 7,10-7,50
Resposta cultural
Características culturais observadas com adição de sangue desfibrinado estéril a 5% p/v, após
uma incubação a 35-37°C por 18-48 horas.
Resposta cultural
Organismo:Neisseria meningitidis ATCC 13090
Inoculação:50-100
Crescimento sem Sangue:Justo
Recuperação sem Sangue: 40-50%
Crescimento com Sangue:Exuberante
Recuperação com Sangue:>=70%
Hemólise: Nenhum
Organismo: Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*)
Inoculação:50-100
Crescimento sem Sangue:Bom
Recuperação sem Sangue:50-70%
Crescimento com Sangue:Exuberante
Recuperação com Sangue:>=70%
Hemólise: Beta
Organismo: Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 (00036*)
Inoculação:50-100
Crescimento sem Sangue:Bom
Recuperação sem Sangue:50-70%
Crescimento com Sangue:Exuberante
Recuperação com Sangue:>=70%
Hemólise: Nenhum
Organismo: Streptococcus pneumoniae ATCC 6303
Inoculação:50-100
Crescimento sem Sangue:Justo-Bom
Recuperação sem Sangue:40-50%
Crescimento com Sangue:Exuberante
Recuperação com Sangue:>=70%
Hemólise: Alpha
Organismo: Streptococcus pyogenes ATCC 19615
Inoculação:50-100
Crescimento sem Sangue:Justo-Bom
Recuperação sem Sangue:40-50%
Crescimento com Sangue:Exuberante
Recuperação com Sangue:>=70%
Hemólise: Beta
Armazenamento e prazo de validade
Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes
da data de validade no rótulo.
Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, após fechar bem o frasco,
a fim de evitar a formação de grumos devido a natureza higroscópica do produto. O
armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em local
ventilado a seco área protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Selar o
recipiente firmemente após o uso.</s
