O Caldo Bile Verde Brilhante 2% é recomendado para a detecção e confirmação de bactérias

 coliformes em água, efluentes alimentos, leite e produtos lácteos.

Composição**

Ingredientes Gms / Litro

Peptona 10.000

Lactose 10.000

Bile # 20.000

Verde brilhante 0,0133

PH final (a 25 ° C) 7,2 ± 0,2

** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho

# - Equivalente a Oxgall

Instruções

Suspenda 40,01 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça se necessário para dissolver

completamente o meio. Distribuir na fermentação tubos contendo tubos Durhams invertidos e

esterilizar em autoclave a 15 lbs de pressão (121°C) por 15 minutos. Para preparação de força

dupla, recomenda-se aquecer o caldo dissolvido (80,02 gramas por litro) a 100°C por 30

minutos.

Princípio e Interpretação

O Caldo Biliar Verde Brilhante 2% é um dos meios mais utilizados para a detecção de bactérias

coliformes na água, águas residuais, alimentos e leite e produtos lácteos. Este meio é formulado

de acordo com a APHA (1, 2, 3) para a presunção identificação e confirmação de bactérias

coliformes (4,5). Este meio também é recomendado pelo Comitê ISO para enumeração de

coliformes pela técnica do número mais provável (6). A peptona serve como fonte de nutrientes

essenciais. A lactose é o carboidrato fermentável. Bile inibe bactérias gram-positivas enquanto

as bactérias gram-negativas são inibidas pelo verde brilhante. Detecta produção de gás a partir

da fermentação da lactose incorporando o tubo de Durham invertido, o que indica a evidência

positiva de coliforme fecal, uma vez que coliformes não fecais crescendo neste meio não

produz gás. Produção adicional de gás no caldo CE (M127) a 45 ° C usado como confirmação

de coliforme fecal. Os formadores de esporos gram-positivos podem produzir gás se a inibição

da bile ou do verde brilhante for enfraquecida pela reação com material alimentar.

Durante o exame de amostras de água, o crescimento de tubos positivos presuntivos

mostrando gás no Caldo de Lactose (M026) ou Caldo Lauril-Triptose (M080) é inoculado em

Caldo Biliar Verde Brilhante a 2% (M121). Formação de gás dentro de 48 ± 2 horas confirma o

teste presuntivo (1).

Tipo de amostra

Amostras de alimentos e laticínios; Amostras de água

Coleta e manuseio de amostras:

Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e

processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (2).

Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de

amostras, de acordo com as diretrizes e os padrões locais. (1)

Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem

descartados.

Aviso e precauções:

Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Usar luvas de proteção / vestuário de proteção /

proteção ocular / facial proteção. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao

manusear amostras e cultura. Precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas

devem ser seguidas durante o manuseio das amostras. As diretrizes de segurança podem ser

consultadas em fichas de dados de segurança individuais

Limitações:

Este meio é recomendado para identificação presuntiva, mais testes bioquímicos são

necessários para confirmação.

Desempenho e Avaliação

O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro

do prazo de validade quando armazenado em temperatura recomendada.

Controle de qualidade

Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo creme a verde pálido

Cor e clareza do meio preparado: Solução de cor verde esmeralda, transparente, sem

precipitado.

Reação: Reação de solução aquosa a 4,0% p / v a 25 ° C. pH: 7,2 ± 0,2

pH: 7.00-7.40

Resposta cultural

Características culturais observadas após uma incubação a 35-37 ° C por 18-48 horas.

Resposta cultural

Organismo: Bacillus Cereus ATCC 10876

Inoculação: >=10³

Crescimento: Inibido

GAS: -

Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Bom-Exuberante

GAS: Reação Positiva

Organismo: Klebisiella aerogenes ATCC 13048 (00175*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Nenhum

GAS: Reação Negativa

Organismo: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Nenhum

GAS: Reação Negativa

Organismo: Staphylococcus aureus ATCC 25923 (00034*)

Inoculação: >=10³

Crescimento: Inibido

GAS: -

Armazenamento e prazo de validade

Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 15-25°C. Use

antes da data de validade em o rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente

armazenado seco, depois de fechar bem o frasco para evitar grumos formação devido à

natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à

formação de caroços.

Armazenar em área ventilada e seca, protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição.

Fechar bem o recipiente depois de usar. Use antes da data de validade no rótulo.

O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte

O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e / ou incineração de preparações

usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na

eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser

descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (7,8).

* Imagem meramente ilustrativa