GAR CROMOGÊNICO DIFERENCIAL CANDIDA - M1297A USO PRETENDIDO Recomendado para o isolamento rápido e identificação de espécies de Candida a partir de culturas mistas em amostras clínicas e não clínicas.COMPOSIÇÃO **Ingredientes (g/L)Peptona especial: 15.000Extrato de levedura: 4.000Cloreto de sódio: 5.000 Hidrogenofosfato Dissódico: 1.000Mistura cromogênica: 7.220Cloranfenicol: 0.500Ágar: 15.000 pH final (a 25°C): 6.3 ±0.2 **Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenhoINSTRUÇÕESSuspenda 42,72g em 1000 mL de água purificada/destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVAR. Esfriar de 45°C a 50°C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.PRINCÍPIO E INTERPRETAÇÃOPerry e Miller (3) relataram que Candida albicans produz uma enzima b -N-acetil-galactosaminidase e de acordo com Rousselle et. al. (4), a incorporação de substratos cromogênicos ou fluorogênicos de hexosaminidase no meio de crescimento ajuda na identificação de isolados de C.albicans diretamente no isolamento primário. O ágar diferencial Candida HiCrome™ é um meio seletivo e diferencial, que facilita o isolamento rápido de leveduras de culturas mistas e permite a diferenciação de espécies de Candida, nomeadamente C.albicans, C.krusei, C.tropicalis e C.glabrata com base na coloração e morfologia da colônia. Neste meio, os resultados são obtidos em 48 horas e é útil para a identificação rápida e presuntiva de leveduras comuns no Laboratório de Micologia e Microbiologia Clínica. O extrato de peptona especial e de levedura fornecem compostos nitrogenados e carbonáceos e outros nutrientes essenciais para o crescimento. O fosfato protege bem o meio. O cloranfenicol suprime a flora bacteriana que o acompanha. C.albicans aparecem como colônias suaves de cor verde claro, C.tropicalis aparecem como colônias elevadas de cor azul a azul metálico. As colônias de C.glabrata aparecem como colônias lisas de creme a branco, enquanto as colônias de C.krusei aparecem como colônias roxo difúso.TIPO DE ESPÉCIMEAmostras clínicas - raspagem de pele, urina.COLETA E MANUSEIO DE AMOSTRAS Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio de amostras de acordo com as diretrizes estabelecidas (3,4). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.AVISO E PRECAUÇÕESUso para diagnóstico In Vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção de olhos / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidas em fichas de dados de segurança individuais.LIMITAÇÕES1. Variações na intensidade da cor podem ser observadas para isolados de Candida dependendo da presença de enzimas.2. Outras espécies de Candida podem produzir colônias de cor lilás claro que também são produzidas por outras células de levedura. Isso deve ser confirmado por mais testes bioquímicos.3. Outros fungos filamentosos também exibem cor neste meio.DESEMPENHO E AVALIAÇÃOO desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções no rótulo dentro do período de validade e quando armazenado na temperatura recomendada.CONTROLE DE QUALIDADEAparência: Pó homogêneo de fluxo livre, de creme a bege Gelificação: Firme, comparável com o gel de ágar a 1,5%Cor e clareza do meio preparado: Formas de gel de cor âmbar claro, transparente a levemente opalescente em placas de PetriReação: Reação de 4.27% p/v em solução aquosa a 25°C. pH: 6.3 ±0.2pH: 6.10 - 6.50Resposta cultural Características culturais observadas após uma incubação de 30°C a 35°C por 40-48 horas.Organismo: Candida albicans ATCC 10231 (00054*) Inóculo(UFC): 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=50% Cor da colônia: Verde claro Organismo: Candida glabrata ATCC 15126 Inóculo(UFC): 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=50% Cor da colônia: Creme a brancoOrganismo: #Teunomyces krusei ATCC 24408 Inóculo(UFC): 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=50% Cor da colônia: Roxo difuso Organismo: Candida tropicalis ATCC 750 Inóculo(UFC): 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=50% Cor da colônia: Azul a roxoOrganismo: Candida kefyr ATCC 66058 Inóculo(UFC): 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=50% Cor da colônia: Creme a branco com o centro levemente roxoOrganismo: Candida utilis ATCC 9950Inóculo(UFC): 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=50% Cor da colônia: Rosa pálido para roxo rosadoOrganismo: Candida parapsilosis ATCC 22019Inóculo(UFC): 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=50% Cor da colônia: Branco a creme Organismo: Candida dubliensis NCPF 3949 Inóculo(UFC): 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=50% Cor da colônia: Verde pálido Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) Inóculo(UFC): >=10^4 Crescimento: inibido Recuperação: 0 Cor da colônia: -Organismo: Staphylococcus aureus subsp.aureus ATCC 25923 (00034*)Inóculo(UFC): >=10^4 Crescimento: inibido Recuperação: 0 Cor da colônia: -Chave: *Correspondente a Números WDCM #: Anteriormente conhecida como Candida krusei ARMAZENAMENTO E VIDA ÚTIL Armazenar entre 15°C e 25°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado entre 2°C e 8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser devidamente armazenado seco, após tampar bem o frasco para evitar formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em área ventilada e seca protegida de extremos de temperatura e fontes de ignição. Selar o recipiente hermeticamente depois de usar. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do período de validade declarado.DISPOSIÇÃOO usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e/ou incineração das preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Seguir procedimentos laboratoriais estabelecidos para o descarte de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra devem ser descontaminados e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais vigentes