Liberase^™ TM de grau para pesquisa

medium Thermolysin concentration

Sobre este item

NACRES:

NA.28

UNSPSC Code:

12352204

Propriedades

form

lyophilized

packaging

pkg of 10 mg (05401119001 [2 x 5 mg]), pkg of 100 mg (05401127001 [2 x 50 mg])

manufacturer/tradename

Roche

parameter

35-37 °C optimum reaction temp.

technique(s)

single cell analysis: suitable, tissue processing: suitable

color

white

optimum pH

7.4

solubility

water: soluble

suitability

suitable for flow cytometry

application(s)

life science and biopharma
sample preparation

foreign activity

Endotoxin 1 EU/mg

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Descrição

General description

A Liberase TM de grau para pesquisa contém colagenase I e colagenase II altamente purificadas. Essas duas isoformas da colagenase são misturadas em uma proporção precisa em relação uma à outra, e com uma concentração de meio de termolisina, uma protease neutra não clostridial.

Application

A Liberase^™(meio de termolisina) de grau para pesquisa é usada para a dissociação de uma ampla gama de tipos de tecidos que requerem que a mistura de enzimas seja de alta pureza para garantir o rendimento e a viabilidade celular. Subprodutos bacterianos, como endotoxinas, são reduzidos em até vários milhares de vezes.

Features and Benefits

• Maximize a viabilidade e o rendimento de células isoladas: com uma mistura enzimática que apresenta menos atividade de clostripain e tripsina, além de um teor reduzido de endotoxinas.
• Conte com uma maior atividade específica da mistura enzimática: como resultado de uma maior pureza de colagenase I + II (determinada por análise de HPLC).
• Obtenha maior reprodutibilidade experimental: devido à maior consistência de um lote para outro.
• Aumente a segurança: com uma enzima que é isenta de quaisquer matérias-primas derivadas de tecidos de mamíferos ou aves.

Preparation Note

Estabilizantes: Cálcio
Concentração de trabalho: Concentração de trabalho da enzima de grau para pesquisa Liberase

As enzimas Liberase têm atividades específicas significativamente mais altas que as colagenases tradicionais. Isso significa que a concentração de trabalho das enzimas purificadas Liberase de grau para pesquisa, expressa em mg/ml, será menor do que a da colagenase tradicional.
Quando a aplicação não estiver incluída nessa lista, use primeiro o Liberase TM de grau para pesquisa em uma concentração de 0,08–0,28 unidades Wünsch/ml. O objetivo é determinar a melhor concentração inicial da mistura enzimática Liberase de grau para pesquisa. Esse é um ponto de partida, e a concentração final pode variar devido a diferenças no procedimento e diferenças de lote para lote na colagenase tradicional.

Concentração de trabalho da colagenase

Multiplique a sua concentração de trabalho de colagenase anterior (mg/ml) pela sua atividade específica (unidades de Wünsch/mg, [conforme determinado acima]), para obter a concentração em unidades de Wünschnsch/ml. Para determinar quanto usar da mistura enzimática Liberase de grau para pesquisa, primeiro multiplique a sua concentração de trabalho de colagenase (em unidades de Wünsch/ml) pelo volume total da sua solução enzimática de trabalho para obter a atividade de colagenase total necessária (unidades de Wünschnsch). Divida a atividade da colagenase total necessária pela concentração-estoque de Liberase de grau para pesquisa(“Reconstituição e armazenamento”). Isso indica quantos mililitros de solução-estoque da mistura enzimática Liberase de grau para pesquisa devem ser usados na solução enzimática de trabalho.
Condições de armazenamento (solução de trabalho): Armazene a solução-estoque não utilizada em alíquotas de uso único entre -15 e -25 °C.

Observação: Evite o congelamento e descongelamento repetido.

Mantenha o recipiente hermeticamente fechado, em local seco e bem ventilado.

Reconstitua a enzima liofilizada com água estéril de qualidade para injeção ou tampão de dissociação de tecidos. Não adicione soro ou outros componentes, como albumina ou inibidores de proteases, ao tampão de dissociação. A estabilidade enzimática é reduzida em concentrações mais altas e temperaturas mais quentes (4 ºC). Evite ambas as condições acima.

Reconstitua o frasco todo. Não pese alíquotas individuais de liofilizado. A introdução de umidade nos frascos resulta em um declínio na atividade enzimática.

Coloque o frasco no gelo para reidratar a enzima liofilizada.

Agite gentilmente o frasco a 2 ºC a 8 °C até que a enzima esteja completamente dissolvida (máx. de 30 min.).

Dependendo do tipo de tampão de dissociação de tecidos usado para dissolver as misturas enzimáticas purificadas Liberase de grau para pesquisa, pode-se observar pequenas precipitações, as quais se dissolvem prontamente na solução de trabalho dissolvida e não afetam a atividade enzimática.

Remova uma alíquota da solução-estoque para preparar a solução de trabalho.

Volume de reconstituição

2 ml (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg), 10 ml (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)

Wünsch de colagenase (unidades/ml)

13 (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg), 26 (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)

Concentração total de colagenase [mg/ml]

2,5 (1 frasco com embalagem de 5 mg–10 mg), 5,0 (1 frasco com embalagem de 50 mg–100 mg)

Other Notes

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Legal Information

Liberase is a trademark of Roche