Isp Meio N.2 - 500 Gr - Himedia
Código: 27427
Uso Pretendido
Para o isolamento e cultivo de leveduras, moldes e outros microrganismos acidúricos.
Composição**
| Ingredientes | g/L |
|---|---|
| Peptone | 5.000 |
| Extrato de levedura | 3.000 |
| Extrato de malte | 3.000 |
| Dextrose (Glicose) | 10.000 |
| Categoria: Agar | 20.000 |
pH final (a 25°C) 6,2±0,2
**Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho
Direções
Suspender 20,5 gramas em 490 ml de água purificada/destilada. Aqueça para ferver para dissolver o meio completamente. Esterilize por autoclavação a 15 libras de pressão (121°C) durante 15 minutos. Para preparar acidificar os meios seletivos acidificar a mídia até pH 3,0 a 4,0 adicionando assepticamente 1 frasco de solução de 10% de ácido láctico (FD095). NÃO AQUEÇA os meios após a adição de ácido. Esfriar a 45-50°C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.
Princípio E Interpretação
O Agar de Malte Levedura é formulado de acordo com Wickerham (1,2) para isolamento e cultivo de leveduras, bolores e outros microrganismos acidúricos. Materiais fungistáticos, como propionato de sódio e difenil, são adicionados ao YM Agar para eliminar os moldes e, assim, permite a enumeração de leveduras da população mista. YM Agar também é recomendado pela APHA (3). Wickerham sugeriu o uso de Caldo de Malte Levedura (M425) como meio de enriquecimento para leveduras, adicionando uma camada de óleo de parafina estéril (cerca de 1 cm) na superfície do caldo inoculado. Após o crescimento, deve ser estriado em YM Agar para obter colônias isoladas de espécies fermentativas. Para isolar cepas fermentativas e oxidativas, o caldo YM acidificado (M425) é colocado em um agitador rotativo por 1 ou 2 dias, o que favorece o desenvolvimento de células de levedura enquanto a esporulação de moldes é prevenida e as leveduras podem ser isoladas por riacho de YM Agar.
A peptona serve como fonte de carbono, nitrogênio, aminoácidos de cadeia longa e outros nutrientes essenciais. O extrato de levedura fornece nutrientes complexos de vitamina B e outros fatores de crescimento. O extrato de malte serve como uma fonte adicional de carbono. A dextrose é a fonte de carboidratos e energia. Para aumentar a seletividade, os meios podem ser acidificados pela adição de ácido láctico estéril100% ou pela adição de 10% de HCl, ácido tartárico ou 10% de ácido cítrico. Alternativamente, antibióticos (penicilina 20U/ml ou estreptomicina a uma concentração final de 40mcg/ml) podem ser adicionados. O meio ágar acidificado não deve ser reaquecido.
Tipo de espécime
Amostras clínicas - Raspages de pele; Amostras de alimentos e laticínios
Coleção e manuseio de espécimes:
Para amostras clínicas, siga técnicas apropriadas para o manuseio de espécimes conforme diretrizes estabelecidas (4,5).
Para amostras de alimentos e laticínios, siga técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras conforme diretrizes (3,6). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados por autoclavagem antes de descartar.
Aviso e Precauções:
Uso diagnóstico In Vitro. Apenas para uso profissional. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/roupa protetora/proteção ocular/proteção facial. Siga boas práticas de laboratório microbiológico enquanto lida com espécimes e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de espécimes clínicos. As diretrizes de segurança podem ser encaminhadas em fichas de dados de segurança individuais.
Limitações :
- Os organismos individuais diferem na sua exigência de crescimento e podem apresentar padrões de crescimento variáveis no meio.
- Cada lote do meio foi testado para os organismos especificados no COA. Recomenda-se aos usuários validar o meio para qualquer microrganismo específico que não seja mencionado no COA com base no requisito exclusivo do usuário.
Desempenho e Avaliação
O desempenho do meio é esperado quando utilizado de acordo com a direção do rótulo dentro do prazo de validade quando armazenado à temperatura recomendada.
Controle de qualidade
Creme de aparência para bege homogêneo pó de fluxo livre
Gelling Firm, comparável com 2,0% Agar gel.
Cor e Clareza de formas de gel de cor âmbar leve médio preparado para gel ligeiramente opalescente em placas de Petri.
Reação Reação de solução aquosa de 4,1% p/v a 25°C. pH: 6,2±0,2
pH 6,00-6,40
Resposta Cultural
Características culturais observadas após uma incubação a 25-30°C durante 40-72 horas.
| Organismo | Inóculo (CFU) | Crescimento a pH 3,4 | Recuperação a pH 3,4 | Crescimento em pH 6,2 | Recuperação |
|---|---|---|---|---|---|
| # Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 (00053*) | 50-100 | bom-luxuriante | >= 50% | bom-luxuriante | >= 50% |
| Candida albicans ATCC 10231 (00054*) | 50-100 | bom-luxuriante | >= 50% | bom-luxuriante | >= 50% |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | 50-100 | inibido | 0% | bom-luxuriante | >= 50% |
| Lactobacillus casei ATCC 9595 Em inglês | 50-100 | pobres | 20-30% | bom-luxuriante | >= 50% |
| Lactobacillus leichmannii ATCC 4797 Em inglês | 50-100 | pobres | 20-30% | bom-luxuriante | >= 50% |
| Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 (00055*) | 50-100 | bom-luxuriante | >= 50% | bom-luxuriante | >= 50% |
Chave: (#) Anteriormente conhecido como Aspergillus niger, (*) Números WDCM correspondentes
Armazenamento e Prateleira
Guarde entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30°C. Utilização antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser armazenado corretamente seco, depois de tampar firmemente o frasco, a fim de evitar a formação de nódulo devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroço. Conservar em área ventilada a seco protegida de extremos de temperatura e fontes de ignição Selar o recipiente firmemente após o uso. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.
Eliminação
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e/ou incineração de preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Seguir procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e material que entre em contato com amostra clínica deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (4,5).
Referência
- Wickerham L. J., 1951, EUA Dept. O Agric. Tecnologia. Touro. No.1029.
- Wickerham L. J., 1939, J. Med Tropical. Hyg., 42:176.
- Salfinger Y., e Tortorello M.L. Quinto (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Alimentos, Associação Americana de Saúde Pública, Washington, D.C.
- Isenberg, H.D. Manual de Procedimentos de Microbiologia Clínica 2a Edição.
- Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11a Edição. Vol. 1. 1.
- Wehr H. M. e Frank J. H., 2004, Métodos Padrão para o Exame Microbiológico de Produtos Lácteos, 17th Ed., APHA Inc., Washington, D.C.

