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Isp Meio N.2 - 500 Gr - Himedia

Código: 27427

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Uso Pretendido

Para o isolamento e cultivo de leveduras, moldes e outros microrganismos acidúricos.

Composição**

Ingredientes g/L
Peptone 5.000
Extrato de levedura 3.000
Extrato de malte 3.000
Dextrose (Glicose) 10.000
Categoria: Agar 20.000

pH final (a 25°C) 6,2±0,2

**Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho

Direções

Suspender 20,5 gramas em 490 ml de água purificada/destilada. Aqueça para ferver para dissolver o meio completamente. Esterilize por autoclavação a 15 libras de pressão (121°C) durante 15 minutos. Para preparar acidificar os meios seletivos acidificar a mídia até pH 3,0 a 4,0 adicionando assepticamente 1 frasco de solução de 10% de ácido láctico (FD095). NÃO AQUEÇA os meios após a adição de ácido. Esfriar a 45-50°C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

Princípio E Interpretação

O Agar de Malte Levedura é formulado de acordo com Wickerham (1,2) para isolamento e cultivo de leveduras, bolores e outros microrganismos acidúricos. Materiais fungistáticos, como propionato de sódio e difenil, são adicionados ao YM Agar para eliminar os moldes e, assim, permite a enumeração de leveduras da população mista. YM Agar também é recomendado pela APHA (3). Wickerham sugeriu o uso de Caldo de Malte Levedura (M425) como meio de enriquecimento para leveduras, adicionando uma camada de óleo de parafina estéril (cerca de 1 cm) na superfície do caldo inoculado. Após o crescimento, deve ser estriado em YM Agar para obter colônias isoladas de espécies fermentativas. Para isolar cepas fermentativas e oxidativas, o caldo YM acidificado (M425) é colocado em um agitador rotativo por 1 ou 2 dias, o que favorece o desenvolvimento de células de levedura enquanto a esporulação de moldes é prevenida e as leveduras podem ser isoladas por riacho de YM Agar.

A peptona serve como fonte de carbono, nitrogênio, aminoácidos de cadeia longa e outros nutrientes essenciais. O extrato de levedura fornece nutrientes complexos de vitamina B e outros fatores de crescimento. O extrato de malte serve como uma fonte adicional de carbono. A dextrose é a fonte de carboidratos e energia. Para aumentar a seletividade, os meios podem ser acidificados pela adição de ácido láctico estéril100% ou pela adição de 10% de HCl, ácido tartárico ou 10% de ácido cítrico. Alternativamente, antibióticos (penicilina 20U/ml ou estreptomicina a uma concentração final de 40mcg/ml) podem ser adicionados. O meio ágar acidificado não deve ser reaquecido.

Tipo de espécime

Amostras clínicas - Raspages de pele; Amostras de alimentos e laticínios

Coleção e manuseio de espécimes:

Para amostras clínicas, siga técnicas apropriadas para o manuseio de espécimes conforme diretrizes estabelecidas (4,5).

Para amostras de alimentos e laticínios, siga técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras conforme diretrizes (3,6). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados por autoclavagem antes de descartar.

Aviso e Precauções:

Uso diagnóstico In Vitro. Apenas para uso profissional. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/roupa protetora/proteção ocular/proteção facial. Siga boas práticas de laboratório microbiológico enquanto lida com espécimes e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de espécimes clínicos. As diretrizes de segurança podem ser encaminhadas em fichas de dados de segurança individuais.

Limitações :

  • Os organismos individuais diferem na sua exigência de crescimento e podem apresentar padrões de crescimento variáveis no meio.
  • Cada lote do meio foi testado para os organismos especificados no COA. Recomenda-se aos usuários validar o meio para qualquer microrganismo específico que não seja mencionado no COA com base no requisito exclusivo do usuário.

Desempenho e Avaliação

O desempenho do meio é esperado quando utilizado de acordo com a direção do rótulo dentro do prazo de validade quando armazenado à temperatura recomendada.

Controle de qualidade

Creme de aparência para bege homogêneo pó de fluxo livre

Gelling Firm, comparável com 2,0% Agar gel.

Cor e Clareza de formas de gel de cor âmbar leve médio preparado para gel ligeiramente opalescente em placas de Petri.

Reação Reação de solução aquosa de 4,1% p/v a 25°C. pH: 6,2±0,2

pH 6,00-6,40

Resposta Cultural

Características culturais observadas após uma incubação a 25-30°C durante 40-72 horas.

Organismo Inóculo (CFU) Crescimento a pH 3,4 Recuperação a pH 3,4 Crescimento em pH 6,2 Recuperação
# Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 (00053*) 50-100 bom-luxuriante >= 50% bom-luxuriante >= 50%
Candida albicans ATCC 10231 (00054*) 50-100 bom-luxuriante >= 50% bom-luxuriante >= 50%
Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) 50-100 inibido 0% bom-luxuriante >= 50%
Lactobacillus casei ATCC 9595 Em inglês 50-100 pobres 20-30% bom-luxuriante >= 50%
Lactobacillus leichmannii ATCC 4797 Em inglês 50-100 pobres 20-30% bom-luxuriante >= 50%
Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 (00055*) 50-100 bom-luxuriante >= 50% bom-luxuriante >= 50%

Chave: (#) Anteriormente conhecido como Aspergillus niger, (*) Números WDCM correspondentes

Armazenamento e Prateleira

Guarde entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30°C. Utilização antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser armazenado corretamente seco, depois de tampar firmemente o frasco, a fim de evitar a formação de nódulo devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroço. Conservar em área ventilada a seco protegida de extremos de temperatura e fontes de ignição Selar o recipiente firmemente após o uso. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Eliminação

O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e/ou incineração de preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Seguir procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e material que entre em contato com amostra clínica deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (4,5).

Referência

  1. Wickerham L. J., 1951, EUA Dept. O Agric. Tecnologia. Touro. No.1029.
  2. Wickerham L. J., 1939, J. Med Tropical. Hyg., 42:176.
  3. Salfinger Y., e Tortorello M.L. Quinto (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Alimentos, Associação Americana de Saúde Pública, Washington, D.C.
  4. Isenberg, H.D. Manual de Procedimentos de Microbiologia Clínica 2a Edição.
  5. Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11a Edição. Vol. 1. 1.
  6. Wehr H. M. e Frank J. H., 2004, Métodos Padrão para o Exame Microbiológico de Produtos Lácteos, 17th Ed., APHA Inc., Washington, D.C.
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